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CTC+ PCR
CTC分離和富集
結(jié)果分析
細胞裂解,提取核酸(DNA或者mRNA)
qPCR,ddPCR
根據(jù)PCR儀配套軟件,進行分析
核酸試劑盒提取流出液中的核酸分子
設(shè)計引物,進行擴增
循環(huán)腫瘤細胞分選儀
案例應(yīng)用:

臨床試驗:


目的: 通過檢測黑色素瘤患者的CTC mRNA生物標志物,可否用于轉(zhuǎn)移黑色素瘤患者進行免疫檢查點抑制劑療效評估。
入組患者:56例黑色素瘤 III/IV期,計劃接受免疫治療(ipilimumab,nivolumab,pembrolizumab)的患者。

檢測分子: CTC的 mRNA 生物標志物——MART1,TRP2,MAGEA3,PAX和GALNCT。


試驗方案:


1.治療前,分離CTC,進行mRNA生物標志物檢測(cutoff≥ 2 mRNA分子);
2.免疫治療后,定期采血,進行CTC mRNA生物標志物檢測,通過PFS, OS等評估CTC mRNA生物標志物與療效的關(guān)系。同時,分離IV期患者的CTC進行成球培養(yǎng)和RNA測序。
結(jié)論:臨床試驗進行中,數(shù)據(jù)待發(fā)表。